猕猴桃细菌性溃疡病菌检疫技术操作办法
日期:2007年07月12  新闻阅读次数:

分 布 北京、河北、辽宁、安徽、江西、山东、河南、湖南、四川、陕西等省(市、区)及湖北省十堰市(房县)、咸宁市(通山县)、恩施州(建始县)
寄主植物 主要危害中华猕猴桃等猕猴桃属植物;人工接种寄主桃、杏、李、梨、樱桃、梅等。
危害及症状 又称猕猴桃溃疡病,是一种毁灭性细菌病害。主要危害猕猴桃的主干、枝蔓、新梢和叶片,极易造成植株死亡。该病常常大规模暴发,导致大面积毁园,造成严重的经济损失。
该病初期在罹病叶上形成红色小点,后病斑周围有明显的黄色水渍状晕圈。数个病斑愈合时,主脉间全成暗褐色,并有菌脓溢出,有时叶片向里或向外翻卷。小枝条发病时呈暗褐色水渍状,并产生纵向线状龟裂,病症不断向伸长的新梢和茎部扩展,很快使整个新梢成暗褐色而萎蔫枯死。病部及周围健康的皮孔可溢出白色水滴状的菌脓。
传播途径 病原菌的自然传播依靠雨水滴溅完成;远距离传播主要依靠人为调运接穗等活体实现。
防治措施
检疫措施 禁止从疫情发生区调运染疫的猕猴桃植株活体。
药剂防治 用6%春雷霉素可湿性粉剂400倍液或波尔多液等防治。在新梢萌芽到新叶簇生期进行第一次用药,以后每隔10d 左右用药1次,喷洒数次。
1. 产地检疫
1.1 踏查
 主干及分枝症状的调查 调查寄主的主干及分枝上部是否有淡黄色或黄褐色病斑;病斑处是否有小孔,从中向外流出白色或铁锈色液体。
枝条及新梢症状的调查 调查枝条上是否有暗绿色或暗褐色水渍状纵向、线形龟裂;新梢是否呈暗褐色萎蔫枯死,病部浸出白色水渍状液体。
叶片症状的调查 调查叶片上是否有红色小点,或褐色多角形病斑,周围有明显黄色水渍状晕圈,叶片向里或向外翻卷。
1.2 标准地调查
标准地设置 按果园面积设置,10hm2以下(含10hm2)设1块,每增加5hm2增设1块。每块标准地面积为0.1hm2,采取棋盘式取样法,抽取样树10株,进行病害分级调查。
1.3 病害分级标准 (以被害株率为标准)
轻 被害株率10%以下;
中 被害株率11%~30%;
重 被害株率31%以上。
1.4 样品的采集与保存 
采集的感病材料应包含植物的所有部分和各种症状部分。应尽可能采集感病初期的病株部分,以利于病原细菌的分离。
样品置于聚乙烯袋内保鲜。样品应冷藏存放,避免受到阳光的照射。
2. 调运检疫
2.1 抽样
苗木100株以内(含100株)的应全部检查;100~1 000株按10%抽取;1 000株以上按一批货物总件数(株)的5%抽取。
苗木按照抽样比例,采取分层方式设5个样点进行抽样。对携带有病症的植株及植株残体应全部进行检查。
2.2 现场检查
 叶片的检查 检查寄主的叶片是否向里或向外翻卷,并有红色小点或多角形病斑,周围有明显黄色水渍状晕圈。
 枝条和新梢的检查 检查1~2年生枝条上是否有水渍状纵向、线形龟裂,新梢是否萎蔫枯死,并有白色水渍状液体溢出。
 寄主干部的检查 检查寄主干部是否在病斑下方呈深褐色并有铁锈色液体溢出。
3. 检疫检验
3.1 溢菌检验
在具典型症状的病部上,取病健交界处的一小块病组织,在显微镜下切片检查是否有大量细菌液溢出。
3.2 分离培养检验
 取小块病斑组织,经用70%酒精和0.5%~1%次氯酸钠表面消毒,灭菌水洗3次后,研碎静置10min,采用培养基进行分离,将分离并经纯化后的细菌移植到BPA培养基斜面上培养48h,置8℃冰箱保存。
 检查在BPA培养基平板上是否形成污白色、圆形、全缘、凸起、光滑、直径约为1~3mm的菌落。
3.3 染色检验
 鞭毛染色 经染媒 5~7min →水洗干燥 → 苯酚品红染色5min → 水洗干燥后镜检。显微镜下菌体和鞭毛为阴性反应,呈红色,极生1~3根。
 革兰氏染色 采用结晶紫草酸铵染色法。经固定涂片 → 染色1min → 碘液处理1min →褪色30s → 复染10min →水洗吸干后镜检。显微镜下菌体为革兰氏阴性反应,呈红色。
病原鉴定 菌体短杆状,有的稍弯曲,革兰氏染色阴性,无荚膜,不产生芽孢;鞭毛单极生1~3根。
4. 除害处理
 人工处理
主干带疫的应刮去病部及其周围健康组织,或铲除病株。
 药剂处理
发现带疫植株,应喷洒1万单位农用链霉素 3 000 倍液,分2~3次进行处理。
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